生物样本稳定性研究常常是所有分析研究人员日常热议的话题之一。在国际生物分析论坛上其也是受到广大研究人员的青睐，其中，拟讨论投票话题最高的有三项与生物样本稳定性直接相关，说明其重要性，保证样本在生物基质中的稳定性是生物样本分析的基本前提。

基于此，各国药监部门均建议对实际研究样本进行再分析。根据我国市场监督管理局在2021年发布的《体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式》，体外诊断试剂的稳定性研究应提交至少3批申报产品在实际储存条件下保存至成品有效期后的实时稳定性研究资料，明确储存环境条件（如温度、湿度和光照）及有效期^[1]。国际上关于体外诊断试剂稳定性的基本要求与我国一致，美国FDA于1991年发布了指导原则《医疗器械货架寿命》^[2]，提供了稳定性研究的考虑因素和验证原则，但未涉及具体的验证方法和测试项目。美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)于2009年发布了《体外诊断试剂稳定性评估指南》(EP25-A Evaluation of Stability of In Vitro Diagnostic Reagents)，为定量和定性体外诊断试剂提供了稳定性研究的指导^[3]。

近年来，生物样本库发展迅速，保存的人体样本多达几十种，而各个样本库并没有采用标准、统一的低温保存技术和方法，在长期的储存过程中，可能造成所需要的样本信息发生变化。所以，在探索低温保存机制的基础上，选择合适的低温保存剂、升降温速率等方法处理样本后，储存在合理的温度环境中，是保证生物样本长期保存质量的关键。

此温度是水的结晶温度，容易对细胞和组织的微观结构造成损害，一般不使用这一温度来保存组织和细胞。且在组织样本内生物大分子受到细胞组织内多种因素的影响，稳定性有可能明显降低，所以通常样本库不使用-60~0℃作为储存温度。

-80℃是较常用的样本保存温度，也是常用超低温冰箱所能达到的温度。基于操作简便性、储存量和成本等因素来考量，这一温度也是目前保存样本中生物大分子活性的常用温度。

但对不同的生物大分子活性来说，这一温度下到底能保持多久的问题仍然处于研究探索中。有研究表明，在-80℃条件下，DNA产量、完整性以及RNA产量可以维持长达7年不发生明显改变，但RNA完整性会在冻存5年后开始下降。因此为长期保存RNA活性，建议使用更低的温度或利用小部分样本提取RNA与剩余样本同步储存。其他样本内的蛋白质和脂类等生物大分子在-80℃下也能保存，但时间长短不一，稳定性逐渐衰减。

-150℃低于水的玻璃化温度(-136℃)，是气相液氮罐和深冷冰箱所能达到的温度，样本在这一低温范围内生物学活动极大降低，是保存样本中细胞活性的理想温度。深冷冰箱是电制冷，无需液氮，装满样本后的稳定温度通常在-140℃以下，和使用气相液氮罐相比，其优势在于不需频繁添加液氮，维护方便。但电制冷的降温速度低于液氮，一旦开启容器取放样本时容易造成较大范围的温度波动，温度恢复时间也相对较长，因而更适合较少开启取放样本的情况。另外，电制冷冰箱必须保障供电，在断电情况下推荐使用液氮设备以提供备份储存。

-196℃是液氮挥发的温度，只有液氮液相保存技术能达到此温度。样

在样本储存在稳定的条件下，应避免反复冻融。样本反复冻融会加快生物大分子物质的降解，严重影响样本的质量。样本在冻存前，最好分装成小份样本再储存，可以避免不必要的反复。